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Abstract :
[fr] La maladie d'Alzheimer (MA) est une maladie neurodégénérative caractérisée par une perte progressive et irréversible des fonctions cognitives. Certaines isoformes des phospholipases sont impliquées dans la neurodégénérescence et leur modulation semble être une nouvelle approche thérapeutique. D'autre part, la barrière hémato-encéphalique (BHE) rend nécessaire le développement de nouvelles stratégies de passage permettant l'accès au cerveau.
Ce projet a pour but de développer une nouvelle stratégie thérapeutique de la MA via la modulation d'une isoforme de la phospholipase A2 (PLA2) par des peptides identifiés par phage display. Cette même technique a été utilisée pour cibler le récepteur aux LDL (LDLR) impliqué dans la transcytose de ces derniers afin d'obtenir des peptides capables de faciliter l'accès au cerveau de nos peptides thérapeutiques.
Concernant le ciblage de la PLA2, trois clones montrant une bonne affinité pour la cible (constantes de dissociation Kd entre 10-13M to 10-12M) et un bon potentiel à inhiber sa liaison à son substrat (constantes d'inhibition IC50 autour de 10-11M) ont été sélectionnés. Après synthèse, la capacité de deux peptides, correspondant aux clones sélectionnés, de se lier à la PLA2 exprimée au niveau du cerveau de souris a été confirmée par immunohistochimie.
Concernant les peptides ciblant le LDLR, deux clones (Kd entre 10-11M et 10-12M) ont été sélectionnés, montrant des caractéristiques intéressantes : ils ne sont pas déstabilisés par les compétiteurs, ils se dissocient du récepteur à pH acide et une inhibition de la liaison est observée en absence de calcium. Les peptides correspondants ont été synthétisés et leur endocytose dans des cellules endothéliales a été confirmée ainsi que leur colocalisation avec le LDLR sur des coupes de cerveau. Le mécanisme d'endocytose de ces peptides a été élucidé, la voie des cavéoles étant privilégiée au détriment de celle des lysosomes, signifiant un court-circuit de la voie de dégradation. Ces peptides seront utilisés dans le cadre du développement d'une molécule pharmaceutique bi-fonctionnelle capable de passer la BHE et moduler l'activité de la PLA2, dans l'espoir d'un traitement plus efficace de la MA.
